分子量120kDa,转膜条件求助最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/04 00:03:49
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分子量120kDa,转膜条件求助最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染
分子量120kDa,转膜条件求助
最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~
半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有
湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染胶都有蛋白,还要再延长时间么……加到250mA~300mA,还是没做出来;PVDF膜,300mA 2h,试了两次,之前用甲醇泡过15-20min激活的,膜有点花,转完膜染胶还是有残留,染膜没怎么看到蛋白,也有注意用冰袋降温了……marker转膜完能看到,脱脂牛奶封闭2h以后膜的颜色不花了,但是marker看不清楚了……
之后一抗santa 1:200 4℃过夜,二扛ICL 1:5000
β-actin用半干转一直都很好,总感觉目的条带不出来可能问题在转膜上,
1、我的转膜条件是不是有问题,如果是,需要怎么调整?
2、湿转液配的时候,120KD需要加SDS么?
分子量120kDa,转膜条件求助最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染
我在网上搜了一下,蛋白质从凝胶转印至膜
1 )半干电转移法
1. 用蒸馏水淋洗半干装置的平板电极.…
具体的你看看这个.
你是做什么用,我来帮你想办法。